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Mélange de chien de bétail Golden retriever

Mélange de chien de bétail Golden retriever


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mélange de chiens de bétail Golden retriever) qui ont été gardés dans des cages jusqu'à ce qu'ils soient euthanasiés. Les tissus ont été prélevés à l'autopsie. Chez chaque chien, l'autopsie a été réalisée sur le côté droit du corps et des échantillons de tissus et d'organes ont été collectés pour des analyses supplémentaires. Toutes les procédures avec des chiens ont été effectuées conformément à la loi danoise sur l'expérimentation animale, la loi danoise sur les animaux expérimentaux et les directives sur le bien-être des animaux dans les procédures scientifiques publiées par le ministère danois de l'Alimentation, de l'Agriculture et de la Pêche (numéro de permis : 2012-15- 2934-00320).

Histologie {#Sec9}

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Des échantillons de tissus de la brn et du cœur ont été fixés dans du formol tamponné neutre à 10 % et traités en routine pour l'histologie. Les échantillons ont été inclus dans de la cire de paraffine, sectionnés et étanchés avec de l'hématoxyline et de l'éosine (H&,E).

Microscopie {#Sec10}

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Un microscope Leica DMRD avec un objectif 100× et un appareil photo numérique Nikon D70 ont été utilisés pour imager les spécimens. Les photos ont été prises avec le logiciel Leica LAS AF (version 2.6.0.7245, Leica) avec une correction de la balance des blancs. Le contrôle du microscope, l'imagerie et l'analyse ont été effectués à l'aide du logiciel Nikon NIS-elements D 4.1 (Nikon, Tokyo, Japon).

Culture cellulaire {#Sec11}

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Des macrophages primaires dérivés de monocytes ont été générés à partir de la moelle osseuse de porcs en bonne santé âgés de 3 semaines par culture pendant 7 jours dans du milieu RPMI 1640 complété avec 5 % de FBS inactivé par la chaleur, 2 mM [l]{.smallcaps}-glutamine, 100 U/ml de pénicilline et 100 g/ml de streptomycine. Au jour 7, les cellules non adhérentes ont été retirées et les macrophages adhérents ont été lavés trois fois avec du PBS. Les cellules ont ensuite été cultivées en milieu frais, avec des changements de milieu tous les 2 jours, jusqu'à la fin de l'expérience.

Les macrophages dérivés des monocytes ont été étalés à une concentration de 1,5 × 10^5^ cellules/puits sur des lamelles de verre, et les cellules ont été conservées dans du milieu RPMI 1640 complété avec 5 % de FBS inactivé par la chaleur, 2 mM [l]{.smallcaps }-glutamine, 100 U/ml de pénicilline et 100 µg/ml de streptomycine. Les cellules ont été stimulées avec de l'IFN-γ (0,1 ng/ml) ou avec du milieu seul (témoin) pendant 24 h. Les cellules ont été lavées avec du PBS et fixées dans du paraformaldéhyde à 4 % pendant 20 min.

Analyses statistiques {#Sec12}

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Les données ont été analysées avec le logiciel GraphPad Prism 6.01. Les différences entre les groupes ont été calculées à l'aide d'une analyse de variance à un facteur (ANOVA) suivie du test de comparaisons multiples de Dunnett ou Sidak. Les différences étaient considérées comme statistiquement significatives lorsque *P* <, 0,05.

Résultats {#Sec13}

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Examen clinique des chiens {#Sec14}

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La nécrose pancréatique infectieuse (NPI) a été diagnostiquée sur la base de signes macroscopiques, tels qu'un pancréas enflé et dur, un aspect trouble et une consistance réduite du suc pancréatique chez trois des 20 chiens atteints de pancréatite idiopathique.

Les 20 chiens étaient négatifs pour les anticorps contre *Leptospira* spp. par MAT, mais tous les sérums ont été testés positifs pour *Salmonella* spp. anticorps par ELISA. Aucun des sérums n'a été testé positif pour *C. difficile*, *E. coli*, *Campylobacter jejuni*, *Campylobacter coli*, *Yersinia enterocolitica*, *Y. pseudotuberculosis*, *Mycobacterium* spp. ou *Brucella* spp. anticorps par ELISA.

Tous les chiens ont présenté une léthargie, et 15 chiens (75 %) ont présenté des vomissements et/ou de la diarrhée, et 13 chiens (65 %) avaient une température supérieure à 38,4 °C au moment de la présentation. Deux chiens n'avaient pas d'appétit. Les chiens avaient un appétit réduit de 1 semaine avant la présentation jusqu'à la fin de l'expérience. Les chiens avaient suivi un régime protéiné strict, avec une médiane de 0,56 g de protéines/kg de poids corporel/jour.

Les 20 chiens n'avaient aucun signe abdominal visible ni aucun signe clinique d'appendicite. Cinq chiens avaient un abdomen distendu et dix chiens avaient un foie sensible ou hypertrophié palpable, mais aucune autre anomalie n'a été observée.

Diagnostic des lésions intestinales nécro-inflammatoires et résultats histopathologiques dans les MICI canines {#Sec15}

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Les observations macroscopiques mn dans l'intestin grêle étaient des hémorragies pétéchiales muqueuses multifocales et une hypertrophie diffuse des intestins (Fig. ,[1](#Fig1){ref-type="fig"}a). Aucune adénopathie mésentérique ni ulcère de la muqueuse n'ont été observés. Trois chiens avaient un intestin épaissi. Deux de ces chiens avaient un intestin fin et rempli de liquide, et un troisième chien avait un intestin épais et ferme avec une fine séreuse. Une coloscopie a été réalisée chez 13 chiens avec des résultats macroscopiques similaires de l'intestin grêle. Ces coloscopies ont révélé des lésions muqueuses similaires. Chez un seul chien atteint d'iléite, la coloscopie était normale. Les coloscopies chez 11 chiens ont révélé des ulcères muqueux, mais une biopsie colique a été réalisée chez seulement deux de ces chiens et une analyse histologique a été réalisée chez l'un d'eux. Chez ce chien, le côlon présentait une entérite lymphoplasmocytaire diffuse légère à sévère avec hyperplasie et nécrose des cryptes, ulcération des muqueuses et cryptite. Le diagnostic histopathologique était l'entérite lymphoplasmocytaire idiopathique (ILE), avec ou sans *Campylobacter* spp.


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